Что такое тимоловая и сулемовая. Тимоловая проба

Тимоловая проба (тимоловероналовая проба, проба Маклагана) - одна из осадочных, или коагуляционных проб, предназначенных для обнаружения изменений качественного и количественного состава белков сыворотки крови при различных заболеваниях.

Тимоловая проба была разработана Маклаганом (M. F. Maclagan) в 1944 году. Проба основана на осаждении белков сыворотки крови путём добавления насыщенного расствора тимола в вероналовом буфере. При положительном результате пробы происходит помутнение исследуемой сыворотки. Степень мутности определяется фотоколорометрическим методом. Результат тимоловой пробы обычно выражают в единицах Маклагана (ед. М).

физико-химическая сущность тимоловой пробы до конца не выяснена. Известно, что в результате реакции образуется сложный комплекс, состоящий из глобулинов, фосфолипидов, холестерина и тимола.

Помимо тимоловой пробы, в разное время было предложено немалое число других осадочных проб. Среди них сулемовая проба, пробы Таката, Гросса, кадмиевая, формоловая, цинк-сульфатная, кефалин-холестериновая пробы, реакции Вейбродта, Вельтманна и др. За исключением кое-где применяемой ныне сулемовой пробы, для клинической практики все они имеют лишь историческое значение.

Норма тимоловой пробы.

Интерпретация, или расшифровка тимоловой пробы довольно проста:

Отрицательная проба означает, что нарушений белкового состава сыворотки крови нет, положительная - что такие нарушения имеются.

О чём говорит положительная тимоловая проба?

Массивные молекулы бел-ков крови поддержи-ваются во взвешенном состоянии благодаря электромагнитному полю на их поверхности

В целом, положительный результат тимоловой пробы характерен для состояния диспротеинемии - нарушения качественного и количественного состава белков сыворотки крови.

Как известно, белки сыворотки крови представлены несколькими фракциями, отличными по своим физико-химическим свойствам. Альбумины являются более лёгкой фракцией, обеспечивающей стабильность всей коллоидной системы крови. Наоборот, глобулины и липопротеины имеют большой молекулярный вес и склонны к оседанию.

Уменьшение количества альбуминов, либо увеличение количества глобулинов, либо появление в крови так называемых параглобулинов, которых в норме не должно быть - всё это неизбежно приводит к нарушению коллоидной стабильности и к склонности белков к коагуляции, т. е. к их слипанию и оседанию. Именно это явление и демонстрирует тимоловая проба.

Ведущую роль в продукции белков крови играет печень. Естественно поэтому, что нездоровое состояние этого органа обычно сопровождается нарушением гармонии белкового состава крови, и соответственно - положительным результатом тимоловой пробы.

Заболевания почек могут сопровождаться выведением с мочой большого количества альбуминов, что приводит к недостатку последних в крови. Потеря большого количества альбуминов также характерна для обширных ожогов.

Увеличение фракции γ-глобулинов - обычное явление при ревматоидных, аутоиммунных и инфекционных заболеваниях.

Равновесие белковых фракций также может быть нарушено появлением в крови так называемых параглобулинов, продуцируемых при миеломной болезни, некоторых злокачественных новообразованиях, наследственных нарушениях белкового обмена.

Коллоидное равновесие сыворотки крови может измениться также вследствие обильного употребления жирной пищи.

При каких заболеваниях тимоловая проба положительна?

• Заболевания печени:
  • острые вирусные гепатиты
  • токсические, алкогольные и лекарственные гепатиты
  • гепатиты при инфекционных заболеваниях - лептоспирозе, бруцеллёзе, мононуклеозе и др.
  • аутоиммунные гепатиты
  • циррозы печени
  • острая жёлтая жировая атрофия печени
  • длительно существующее нарушение оттока жёлчи при механической желтухе
  • фунциональные нарушения печени при неконтролированном приёме стероидных препататов и конрацептивов
  • опухоли печени и др.
• Заболевания почек, сопровождающиеся потерей с мочой альбуминов:
  • гломерулонефрит
  • пиелонефрит с нефротическим синдромом
  • амилоидоз почек
• Системные ревматоидные заболевания:
  • системная красная волчанка
  • ревматоидный полиартрит
  • узелковый периартериит
  • дерматомиозит и др.
• Заболевания пищеварительной системы:
  • панкреатит
  • энтериты с тяжёлым поносом
• Острые вирусные инфекции
• Малярия
• Миеломная болезнь
• Наследственные нарушения белкового обмена - криоглобулинемия, макроглобулинемия и др.
• Злокачественные новообразования

Перечислить в рамках этой статьи все заболевания, способные дать положительную тимоловую пробу, не представляется возможным. Впрочем, это и не нужно делать, так как большая часть таких болезней встречается чрезвычайно редко.

Тимоловая проба и гепатиты.

При всём многообразии заболеваний, сопровождающихся положительной тимоловой пробой, последняя наиболее полезна для ранней диагностики гепатитов - воспалительных заболеваний печёночной ткани вирусного, токсического и др. происхождения.

Высокая чувствительность тимоловой пробы позволяет заподозрить гепатит на той ранней стадии, когда и даже сохраняют нормальный уровень. И уж в любом случае задолго до появления желтухи.

После перенесенного вирусного гепатита тимоловая проба остаётся положительной длительное время - полгода и даже год. В этом периоде она также незаменима для наблюдения за динамикой восстановления функции печени.

Диагностическое значение тимоловой пробы.

Тимоловая проба подтверждает или отрицает факт нарушения качественного или количественного состава белков крови, а также даёт некоторое представление о выраженности этих изменений. Но она не даёт ответа на вопрос: "В чём заключаются эти нарушения?". И уж тем более сама по себе не предоставляет информации о причинах таких нарушений. Бытовавшее в прежние годы представление о тимоловой пробе как о реакции, высокоспецифичной для патологии печени, оказалось несостоятельным.

В этой связи впервые выявленная положительная тимоловая проба может служить лишь предварительным индикатором изменений белкового состава крови. Применительно к заболеваниям печени результат этой пробы следует трактовать с определённой осторожностью. Не следует забывать, что патология печени - самая частая, но не единственная причина положительной тимоловой пробы. В любом случае показатель тимоловой пробы следует рассматривать в комплексе с другими исследованиями: , и др.

Для исследования нарушений белкового состава крови в наше время имеются более продвинутые методы: электрофорез и иммунологические тесты.

Тем не менее благодаря своей простоте тимоловая проба всё ещё находит широкое применение в медицинской практике.

Лабораторно-инструментальные методы исследования не утрачивают значимых позиций, несмотря на то, что визуализирующие методики становятся все совершеннее. Особенно это касается диагностики заболеваний пищеварительного тракта, в частности печени. Ультразвуковое исследование, томография позволяют оценить макро-характеристики органа, его структуру, наличие очаговых или диффузных изменений. Лабораторные пробы призваны диагностировать функционирование органа. В рамках статьи рассмотрены осадочные пробы, среди которых важное место занимает тимоловая.

Это осадочная реакция, которая призвана выявить нарушение белоксинтезирующей функции печени. Она чувствительна к нарушению взаимоотношения или баланса между глобулиновой фракцией и альбуминами.

При большинстве печеночных заболеваний, которые сопровождаются снижением способности к синтезу белковых структур, повышены показатели тимоловой пробы. Но существуют и другие причины, которые могут повлиять на результат исследования:

• нефротический синдром с потерей белка;
• системные заболевания;
• уутоиммунная патология;
• болезни соединительной ткани.

Только адекватный всесторонний подход к проблеме позволит адекватно оценить результаты пробы и ситуацию в целом.

Как осуществляется анализ?

Первоочередно пациенту следует объяснить суть процедуры и ее предназначение. Тимоловая проба, как и другие осадочные методы, используются для оценки белоксинтезирующей функции печени. При печеночной недостаточности эта способность гепатоцитов утрачивается в разной степени.

Пациент утром натощак приходит в лабораторию, где осуществляют забор венозной крови. Важно, чтобы за 6-8 часов до исследования он не принимал пищу. Исключают прием алкоголя за несколько суток до исследования, использование кофеинсодержащих напитков.

Сыворотка крови обследуемого добавляется к специальному раствору с известной кислотностью (водородный показатель равен 7,8). Объем тимола 5-7 мл. Он растворен в вероналовой буферной системе. Тимол – не кислота, это представитель группы циклических соединений, называемых фенолами. При связывании с глобулинами (их избытком), холестеролом, фосфолипидами в условиях известной кислотности исследуемый раствор мутнеет. Степень помутнения оценивается с помощью колориметрического или нефелометрического метода. Она сравнивается с мутностью раствора сульфата бария, принятая за единицу. Когда оцениваются результаты тимоловой пробы, показатели нормы варьируют от 0 до 5 единиц.

Интерпретация результатов

Результаты пробы в заключении врачей-лаборантов выглядят следующим образом: проба положительная или проба отрицательная. Иногда возможно указание на степень повышения. Выражается в количестве «крестов» или единиц (при норме от 0 до 5).

Тимоловая проба повышена при заболеваниях печени, связанных с воспалительным компонентом. Это вирусные и токсические гепатиты, холестатические поражения органа. Обычно в случае острого повреждения гепатоцитов в силу цитопатического (разрушающего клетки) действия вирусов проба резко положительная. Если имеет место хронический гепатит, результаты тимоловой пробы могут быть в пределах нормы, либо слегка повышены.

Фиброз и цирроз также могут повысить вероятность выявления положительной осадочной пробы. Поражение печени токсическими продуктами, лекарственными средствами также снижает ее белоксинтезирующую функцию за счет некроза клеток. Синтез альбумина уменьшается, в то время как в больших (относительно альбумина) концентрациях появляются глобулиновые фракции.

Другие состояния, вызывающие положительный результат

Причины снижения уровня альбуминов по сравнению с глобулинами заключаются не только в патологии печени.
Существует ряд болезней и состояний, способных вызвать такие результаты исследования.

Сначала следует исключить нефротический синдром. Он вызван диабетической, уремической нефропатией, а также различными вариантами гломерулонефритов. Подтверждают догадки анализы мочи и крови с оценкой биохимического профиля.

Следующая группа причин – аутоиммунные болезни и заболевания соединительной ткани. Исключают системную красную волчанку (а также люпус-нефрит), склеродермическое поражение, синдром Шегрена, полимиалгию. Для этого врач назначает анализы на иммунологические маркеры.

Часто положительный результат наблюдается при злокачественных опухолях. Это имеет место при так называемом паранеопластическом синдроме.

Недостатки метода

Преимущества анализа в том, что он очень чувствительный. В то же время проведение тимоловой пробы относительно недорого. Но имеются недостатки.

Они связаны с низкой специфичностью. То есть при положительном результате исследования говорить о какой-то определенной патологии нельзя. Группы причин, вызывающих повышение колориметрических характеристик раствора, перечислены выше. Стоит заметить, перечень довольно внушительный.

Осадочные пробы больше используются для подтверждения факта нарушенной функции печени. Кроме тимоловой, используется сулемовая проба. Ее принцип основан на феномене флокуляции. Реактивом является хлоридная соль ртути – сулема. При избытке глобулинов сыворотки крови в пробирке видны хлопья – осадок. Проба считается положительной. Но говорить о каком-то конкретном заболевании она не может, как и тимоловая.

При исследовании больного для врача важно понимать смысл назначения анализов. При выявлении положительной тимоловой пробы становится понятным, что вероятнее всего имеет место нарушение функции печени. Но в то же время так проявляться могут и другие патологии. Этот повод задуматься и составить адекватный план дальнейшей диагностики.

Печеночные патологии не имеют ярко выраженных симптомов, поэтому для их определения нужны надежные методы обследования. Диагностика болезней печени проводится с применением лабораторных анализов и инструментальной диагностики. В установлении диагноза лабораторным методом особое значение имеет биохимический анализ крови, в который входят печеночные пробы.

При подозрении на патологию печени лечащий врач обязательно назначает общий и биохимический анализы крови. Этот комплекс необходим для диагностики, поскольку при деструктивных печеночных процессах состав крови изменяется.

К печеночным пробам относятся следующие показатели биохимического анализа :

Тесты с изучением этих показателей позволяют определить состояние печени, выявить наличие патологического процесса и, частично, оценить степень тяжести заболевания.

Правила проведения анализа

Чтобы результаты исследований объективно отражали клиническую картину, есть определенные правила. Когда и как сдавать кровь на печёночные пробы?

Кровь сдают в лабораторных условиях рано утром. Делать это необходимо на голодный желудок . Нельзя пить чай или воду, поскольку это запустит пищеварительный процесс и циркуляцию желчи. Результаты таких анализов будут неточными. В некоторых случаях перед сдачей крови запрещено не только есть или пить, но и чистить зубы.

Также искажают анализы такие факторы, как:

1. Утренние физические нагрузки.
2. Курение.
3. Принятый накануне алкоголь, в том числе пиво.
4. Употребление большого количества жирной пищи и крепкого кофе в вечер, предшествующий сдаче крови.
5. Прием некоторых лекарственных препаратов.
6. Беременность.
7. Стрессовые ситуации.

ВАЖНО! Биохимический анализ грудного ребенка может иметь искаженные результаты при кормлении грудным молоком, если мать курит или употребляет спиртные напитки.

У взрослых пациентов забор крови производится из вены на внутреннем сгибе локтя. Если доступ к венам в этом месте затруднен, забор крови может осуществляться из вен на тыльной стороне кисти или из вен, расположенных на ногах. У грудных детей кровь на анализ берут из вен, расположенных на головке или на пятке. Дети постарше сдают анализ так же как взрослые.

Расшифровка анализа

Анализ печеночных проб проводят инвитро, тщательно исследуя образец крови. Расшифровка и аналитическая трактовка результатов проводятся специалистом с учетом различных факторов, влияющих на уровень показателей. Самостоятельная диагностика, по результатам анализов, не будет соответствовать действительности, поэтому доверьте ее профессионалам.

Трансаминазы

Главными показателями, подтверждающими наличие патологии печени, являются (аминотрансферазы). Это ферменты, ускоряющие внутриклеточную реакцию метаболического обмена. Они являются маркерами печеночных патологий, поскольку в нормальном состоянии их количество в крови совсем незначительно. Основными ферментами, определяющими наличие деструктивного процесса, являются АЛТ (АлАт), АСТ (АсАт) и ГГТ (ГГТП).

1 . АЛТ или аланинаминотрансфераза . Основной маркер болезней или существующих функциональных нарушений печени. Фермент вырабатывается, в основном, клетками печени. Эта трансаминаза помогает диагностировать проблему на достаточно раннем сроке (2-3 неделя). Повышение уровня АЛТ всегда свидетельствует о наличии патологии.

Возвращение этого показателя на нормальный уровень говорит о следующем:

• Благополучное выздоровление.
• Тяжелая степень разрушения печеночных тканей.

2 . АСТ или аспартатаминотрансфераза . Этот печеночный фермент содержится в сердечном миокарде и в печени.

Его повышенный уровень наблюдается в двух случаях:

• При инфаркте миокарда. Наблюдается резкое повышение АСТ при незначительных колебаниях АЛТ.
• При поражении печени. Уровни АСТ и АЛТ в этом случае повышены практически одинаково.

3 . ГГТ или гаммаглутаминотрансфераза . Один из ферментов печени, высокий уровень которого диагностирует практически все патологии печени, а также сопутствующих органов и прилегающих тканей.

Выявляет следующие деструктивные процессы:

В таблице приведена расшифровка анализа, норма трансфераз указана для здорового человека:

ГГТ, МЕ/литр * — через / указаны значения для разных диагностических методов.

Для точного определения патологии, которая стала причиной повышения этих показателей, существует специальный индекс — коэффициент де Ритиса. В норме, для здорового человека, он равен 1,33(+/- 0,4). Рассчитывается по формуле: к = АСТ/АЛТ.

Повышенные результаты свидетельствует о кардиологической проблеме. Печеночные патологии определяются по пониженному коэффициенту.

Билирубин

Один из составляющих показателей печеночных проб – это билирубин, желчный пигмент. Он производится в результате расщепления гемосодержащих белков.

Его избыточное образование позволяет заподозрить наличие таких печеночных патологий, как :

• Гемолитическая желтуха , вызванная чрезмерным распадом эритроцитов.
• , которая развивается вследствие поражений тканей печени вирусными гепатитами или циррозом.
• , развивающаяся при поражениях желчного пузыря и желчных протоков.

При анализе проверяют все компоненты желчного пигмента в сыворотке крови. Оценивают общий билирубин, а также фракции, из которых он состоит. Это следующие показатели:

1. Непрямой (несвязанный) билирубин. Он наиболее токсичен, поскольку способен проникать в клеточные структуры и разрушать их. Отмирание клеток влечет за собой постепенную некротизацию тканей.
2. Прямой (связанный). Этот показатель превышает норму в том случае, если гепатоциты в печени подвержены воздействию таких патологий, как гепатит, фиброз, цирроз, заболевания билиарного тракта или при механических повреждениях печени.

Норма билирубина находится в пределах от 3,3 до 20 мкмоль/л (связанный около 25 %, несвязанный до 75 %). При повышенном уровне, наблюдается желтая пигментация кожных покровов и покраснение мочи.

ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ! Превышение нормы билирубина является одним из маркеров функциональных нарушений при гепатите С.

Щелочная фосфатаза

Желчный фермент, который участвует в метаболическом фосфорном обмене. Норма его находится в диапазоне значений от 20 до 140 МЕ/л. Повышение этого показателя возникает в результате холестаза (закупорки желчных протоков), или гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени). Высокие показатели, но в пределах нормы, бывают у детей, а также у женщин во время беременности или менопаузы.

Если щелочная фосфатаза (ЩФ) повышена, причины не всегда связаны с проблемами печени. При диагностике важно дифференцировать заболевания, вызывающие атипичное количество ЩФ в кровотоке.

Общий белок

Анализ крови на количество общего белка в сыворотке имеет важное диагностическое значение. Концентрация его в крови здорового человека различна для детей и взрослых. Значения составляют 49-80 г/л и 65-83 г/л, соответственно. Показатели могут как повышаться, так и падать. При диагностике заболеваний печени обращают внимание на низкий общий белок.

• Гипопротеинемия (низкое количество) определяется, когда происходит значительная гибель белков. Это случается из-за хронических патологических процессов в печени, вызванных гепатитом, циррозом, алкогольной или лекарственной интоксикацией организма.
• Гиперпротеинемия (высокое количество) возникает при диарее, ожогах или ОРВИ.

Альбумин

Печеночные пробы включают в себя такой показатель, как сывороточный альбумин. Этот белок синтезируется в печени. В стабильном состоянии, у здорового взрослого человека, он составляет от 35 до 50 г/л. В детском возрасте это значение находится в пределах от 25 до 55 г/л.

Для болезней печени характерно резкое снижение сывороточного альбумина. Его низкое значение может также сопровождать такую патологию, как нефротический почечный синдром.

Тимоловая и сулемовая пробы

Проведение тимоловой пробы назначают для дифференцированного анализа паренхимных патологий.

С ее помощью диагностируются такие заболевания, как:

• Гепатит A.
• Цирроз.

Проба Вельтмана 0,4-0,5 мл р-ра Са (V-VII пробирка)

Коллоино-осадочная реакция Вельтмана, основанная на образовании преципитата белков под влиянием хлористого кальция, может изменяться в двух направлениях: в сторону укорочения коагуляционной ленты (полосы) или ее удлинения.

К удлинению полосы приводят усиление разрастания соединительной ткани в органах (фиброз), пролиферация тканей, ускорение деления клеток, разрушение эритроцитов (гемолитические состояния), повреждение паренхимы печени. Удлинение полосы отмечается при вирусном гепатите, циррозе, острой желтой атрофии печени, малярии, после переливания крови, аутогемотерапии и при многих воспалительных заболеваниях (пневмония, плеврит, туберкулез легких). Удлинение коагуляционной ленты может вызываться и повышением содержания гамма-глобулинов, снижающих коллоидную стабильность сыворотки.

Укороченеи обнаруживается при острых воспалительных и экссудативных процессах, при которых увеличивается содержание альфа- и бета-глобулинов и за счет этого повышается стабильость сыворотки крови, а именно: при экссудативной фазе ревматизма, активном туберкулезе легких, нефротическом синдроме, макроглобулинемии Вальденстрема, альфа-2-, бета-плазмоцитомах, злокачественных опухолях, экссудативном перитоните, некрозах (омертвении, разрушении тканей), острых инфекционных заболеваниях. Крайнее укорочение полосы (отрицательная проба) наблюдается у больных острым ревматизмом.

Сулемовая проба 1,6-2,2 мл дихлорида ртути

Сулемовая проба (реакция Таката — Ара) — это реакция флоккуляции, применяемая при исследовании функции печени. Сулемовая проба основана на способности сывороточного альбумина поддерживать устойчивость коллоидного раствора хлорной ртути и карбоната натрия. При изменении соотношения между белковыми фракциями плазмы крови в сторону глобулинов, которое чаще всего возникает при нарушении функции печени, устойчивость коллоидов нарушается, и из раствора выпадает хлопьевидный осадок.
В норме образования хлопьевидного осадка не происходит. Реакция считается положительной, если осадок наблюдается не менее чем в 3 пробирках.
Сулемовая проба не является строго специфической и бывает положительной как при паренхиматозных поражениях печени, так и при некоторых новообразованиях, ряде инфекционных заболеваний и др.

Тимоловая проба 0-5 ед. SH

Тимоловая проба — проба для определения функционального состояния печени. Она основана на свойстве насыщенного раствора тимола в вероналовом буфере с рН=7,8 давать с сывороткой крови помутнение. Степень мутности тем больше, чем выше содержание в сыворотке гамма-глобулинов (при одновременном падении содержания альбуминов). Степень мутности определяют обычно нефелометрически, сравнивая мутность пробы с мутностью серии стандартных суспензий сульфата бария, одну из которых принимают за единицу. В норме мутность равна от 0 до 4,7 единиц. Повышенные показатели тимоловой пробы свидетельствуют о повышении в крови концентрации α-, β- и γ-глобулинов и липопротеидов, что чаще всего наблюдается при заболеваниях печени. В то же время тимоловая проба не является абсолютно специфичной, так как может быть повышенной при некоторых инфекционных заболеваниях и новообразованиях.

Для изучения белкового обмена в КДЛ достаточно широко используются коллоидно­осадочные пробы.

Основными реакциями этого типа являются тимоловая и сулемовая пробы.

Тимоловая проба основана на помутнении смеси: при взаимодействии сыворотки с насыщенным раствором тимола в вероналоновом буфере.

Определение степени мутности проводят фотометрически при длине волны 630-690 нм против рабочего реагента и выражают результат в единицах S-H.

В норме 0-4 ЕД S-H.

Более высокие цифры единиц помутнения могут косвенно указывать на диспротеинемию и характеризуют повышение содержания гамма-глобулинов.

Сулемовая проба основана на том, что сулема в присутствии мелкодисперсных растворов белков способна образовывать коллоидные растворы солей ртути. При нарушении дисперсности белковых фракций сыворотки крови происходит осаждение грубодисперсных частиц.

Результат выражают в количестве миллилитров сулемы, пошедшем на титрование.

Норма 1,6-2,2 мл сулемы. Как правило, сулемовая проба бывает положительной при токсических поражениях печени, циррозе, силикозе.

Лабораторная диагностика нарушений азотистого обмена

Если белки сыворотки крови денатурировать растворами кислот (например, ТХУ, фосфорно-вольфрамовой или фосфорно-молибденовой) и удалить центрифугированием, то в растворимом центрифугате остается ряд низкомолекулярных азотсодержащих соединений. Эта группа соединений получила название фракции остаточного азота.

В состав фракции остаточного азота входят азот мочевины (46-60 %), азот аминокислот (25 %), креатина и креатинина (7,5 %), мочевой кислоты (4 %), индикана, аммиака (0,5 %) и др.

Мочевина

Елавной составной частью фракции остаточного азота является мочевина. Поэтому величина общего остаточного азота обычно пропорциональна величине мочевины, и для диагностических целей, как правило, исследуют содержание мочевины.

В качестве унифицированных утверждены диацетилмонооксимный метод и уреазный метод.

У здорового человека содержание мочевины в крови колеблется в пределах 2,5-8,33 ммоль/л. У лиц старше 60 лет уровень мочевины может слегка превышать норму.

Нормальные величины

Нормальные величины для мочи составляют 330-580 ммоль/сутки.

Значение

Содержание мочевины увеличивается при острых и хронических заболеваниях почек, протекающих с нарушением их функции; при снижении почечной перфузии вследствие шока, застойной сердечной недостаточности, обезвоживания при рвоте, поносе, повышенном диурезе или потоотделении; при усиленном катаболизме белка в случае острого инфаркта миокарда, ожоговой болезни, стресса; при диете с высоким содержанием белка.

Креатинин

Креатинин является конечным продуктом азотистого обмена.

Суточное выделение креатинина для каждого человека зависит от его мышечной массы и является довольно постоянной величиной.

В качестве унифицированного утвержден метод, основанный на реакции Яффе в модификации Поппера.

Нормальные величины

В сыворотке крови: у мужчин - 44-100 мкмоль/л; у женщин - 44-88 мкмоль/л.

Значение

За сутки с мочой выводится 4,4-17,7 ммоль креатинина.

Уровень креатинина возрастает при нарушении функции почек любого происхождения, активной акромегалии и гигантизме, гипертиреозе; при приеме аскорбиновой кислоты, фуросемида, глюкозы, стрептомицина, рентгеноконтрастных средств, содержащих йод.

Креатинин не является чувствительным показателем функционального состояния почек в начальной стадии хронической почечной недостаточности, однако увеличение его уровня может произойти еще до повышения содержания мочевины и остаточного азота.

Проба Реберга

Одновременное определение у одного и того же пациента концентрации креатинина в крови и моче значительно расширяет возможности исследования функционального состояния почек. В клинической практике для определения величины фильтрации и реабсорбции чаще всего используется проба Реберга.

Для проведения пробы собирают мочу в течение четко обозначенного интервала времени (2, 4, 12 или 24 ч). Во время проведения пробы больной не должен принимать мясную пищу, кофе, чай, лекарства, а также АКТГ, кортизон, тироксин до и во время проведения теста. Количество принимаемой жидкости должно быть не менее 1,5-2 л, чтобы минутный диурез составил 2 мл/мин и более.

Взятие крови осуществляют в середине периода сбора порционной мочи. Нужно точно указать объем мочи, время, в течение которого она собрана, время, когда взята кровь. При сборе суточной мочи кровь берется в конце сбора мочи. Также необходимо указать рост и вес пациента для расчета поверхности тела.

В моче и крови определяют содержание креатинина и по формуле рассчитывают уровень фильтрации и реабсорбции.

где F - фильтрация;

U - концентрация креатинина в моче;

V- объем мочи в мл, отнесенный к минуте;

S - концентрация креатинина в сыворотке;

BSA - площадь поверхности тела в м2 (определяется по номо грамме).

Референтные пределы, метод Яффе:

1) 1-2 месяца - более 54 мл/мин/1,73 м2;

2) 3-12 месяцев - более 64 мл/мин/1,73 м2;

3) 3-13 лет - более 120 мл/мин/1,73 м2;

4) взрослые - более 95 мл/мин/1,73 м2.

Канальцевая реабсорбция (R) определяется по формуле:

где F - фильтрация клубочковая, мл/мин; минутный диурез - количество мочи / количество минут (время, за которое собрана моча);

V- минутный диурез.

В норме R = 99 %.

Варианты патологии клубочковой фильтрации:

1) более 120 мл/мин - ранние этапы сахарного диабета, гипертонической болезни, нефротического синдрома;

2) 85-30 мл/мин - умеренное снижение функции почек как настораживающий фактор при подозрении на почечную недостаточность;

3) 60-15 мл/мин - почечная недостаточность от компенсированной стадии до субкомпенсированной стадии;

4) менее 15-10 мл/мин - почечная недостаточность в стадии декомпенсации.

Варианты патологии канальцевойреабсорбции

Канальцевая реабсорбция выше 99,6 % говорит о различных видах гиповолемических состояний, менее 98 % - о нарушении функции канальцев (пиелонефрит, врожденные аномалии, интерстициальный нефрит, гломерулонефрит, почечная недостаточность).

Мочевая кислота является продуктом распада пуриновых нуклеотидов, входящих в состав нуклеиновых кислот, макроэргических соединений, некоторых витаминов. Величина экскреции мочевой кислоты с мочой зависит от присутствия пуринов в пище: при обычной диете с мочой ежедневно выделяется до 0,7 г мочевой кислоты, при богатой пуринами диете - до 1 г.

В КДЛ для определения содержания мочевой кислоты используют в основном химический колориметрический и ферментативный методы.

Принцип колориметрического метода

Мочевая кислота восстанавливает фосфорно-вольфрамовый реактив с образованием комплекса голубого цвета. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевой кислоты.

Принцип ферментативного метода

Уриказа окисляет мочевую кислоту до аллантоина в соответствии с реакцией. Мочевая кислота + 2Н20 + С2 - уриказа аллантоин + 2Н202 + С02. Аллантоин не поглощает свет с длиной волны 293 нм, поэтому убыль оптической плотности смеси пропорциональна концентрации в ней мочевой кислоты.

Нормальные величины

В сыворотке крови у мужчин - 0,24-0,5 ммоль/л, у женщин - 0,16-0,4 ммоль/л.

Определение содержания мочевой кислоты в крови имеет большое диагностическое значение при подагре и почечной недостаточности.

Гиперурикемия может наблюдаться также при лечении цитостатическими препаратами, злоупотреблении алкоголем, при голодании.

Лабораторная диагностика нарушений углеводного обмена В крови находится ряд углеводов, из которых самым важным является глюкоза. Ее концентрация в крови здорового взрослого человека составляет 3,33-5,55 ммоль/л. Из других углеводов, содержащихся в крови, следует отметить гликоген - 16,2-31,7 мг/л, фруктозу - 5,55-27,75 мкмоль/л, пентозу - 0,12-0,22 ммоль/л, другие полисахариды - около 1,8 г/л. Под «сахаром крови» в узком смысле слова подразумевают только глюкозу.

Для определения глюкозы в крови предложено много методов, которые условно можно разделить на 3 группы.

Редуктометрические методы основаны на восстанавливающих свойствах глюкозы. К ним относится унифицированный метод Хайгедорна - Иенсена. Метод основан на свойстве сахаров при кипячении в щелочной среде восстанавливать красную кровяную соль в желтую кровяную соль. По степени восстановления титрометрически определяют концентрацию сахара крови. Недостаток метода заключается в том, что, в сущности, он определяет не только глюкозу, но и ряд других веществ, обладающих восстанавливающими свойствами (мочевую кислоту, глюкуроновую кислоту, витамин С и др.). Поэтому данные редуктометрических методов значительно выше концентрации глюкозы в крови.

Колориметрические методы основаны на цветных реакциях между глюкозой и концентрированной серной кислотой; глюкозой, концентрированной серной кислотой и альфа-нафтолом, или тимолом. К этой группе методов относится ортотолуидиновый метод.

Принцип: метод основан на образовании из глюкозы при нагревании в кислой среде оксиметилфурфурола, который, взаимодействуя с ортотолуидином, дает соединение зеленого цвета; интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации глюкозы в крови.

Энзиматические методы отличаются самой высокой специфичностью. Существуют различные возможности для энзиматического определения глюкозы. Наиболее широкое распространение получил глюкозооксидазный метод.

Клиническое значение

Гипергликемия - частый симптом при различных заболеваниях, прежде всего связанных с поражением эндокринной системы. Это сахарный диабет, феохромоцитома, тиреотоксикоз, акромегалия, гигантизм, синдром Кушинга. Наблюдается при заболеваниях поджелудочной железы (панкреатит, муковисцидоз, опухоль), шоке, ожогах. Гипергликемию вызывает ряд лекарств (глюкоза, кофеин, адреналин, АКГТ, кортикостероиды, тироксин, пероральные контрацептивы, диуретики, индометацин и др.).

Гипогликемия имеет место при инсулиноме, дефиците глюкагона, опухолях различных органов (рак надпочечников, желудка, фибросаркома), тяжелых поражениях печени, гипотиреозе и т. д.

С диагностической целью используют пробу с нагрузкой глюкозой - тест толерантности к глюкозе.

В течение 3-7 дней до начала теста обследуемый находится на обычной диете без ограничения и избытка жиров и углеводов.

За 3 дня отменяются инъекции глюкозы, кофеина, адреналина. В течение 3 дней пациент не должен изменять привычного режима питания и мышечной нагрузки, получая диету, содержащую не менее 150 г углеводов в сутки. В день, предшествующий проведению теста, последний прием пищи не позднее 20 ч. Перед проведением пробы необходимо 30 мин спокойно посидеть. Во время проведения пробы нельзя курить.

Кровь берут из пальца или из вены натощак и через 120 мин после перорального введения глюкозы (250-350 мл водного раствора глюкозы из расчета 1,75 г глюкозы на 1 кг массы обследуемого, для взрослого 75 кг, не более 75 г глюкозы для ребенка).

Если уровень глюкозы натощак превышает 8 ммоль/л, тест обычно прерывается.

Гликозилированный гемоглобин

Для скрининга населения на сахарный диабет определяют гликозилированный гемоглобин (HbAic). Определение HbAic может быть использовано также для диагностики ранних форм диабета (достоверно повышен у лиц с нарушенной толерантностью к глюкозе), для контроля за состоянием и лечением больных сахарным диабетом.

Гликозилированный гемоглобин - показатель гомеостаза глюкозы, интегральный показатель транзиторной гипергликемии, имевшей место у пациента в течение 3-4 месяцев, предшествующих определению.

В зависимости от метода определения содержание HbAic составляет 3-6 % от общего гемоглобина у здоровых лиц и около 20 % у пациентов с тяжелыми, запущенными, некомпенсированными формами сахарного диабета.

При определении HbAic используются методы хроматографии, электрофореза и изоэлектрического фокусирования. Эти методы характеризуются высокой точностью, но требуют специальной аппаратуры и реактивов, трудоемки в исполнении, поэтому наибольшее распространение получили менее точные, но более доступные химические колориметрические методы. Преимуществом этих методов является возможность использовать в качестве стандарта фруктозу и то, что условия взятия и хранения крови, гемоглобинопатии мало влияют на результаты анализа; эти методы не требуют специального оборудования, удобны для повседневного использования, могут быть выполнены с помощью готовых наборов реактивов.

Для работы используют цельную кровь, взятую с антикоагулянтами, эритроциты многократно отмывают от белков и глюкозы изотоническим (0,9 %) раствором хлорида натрия. Отмытые эритроциты до исследования могут храниться в холодильнике до 2 недель.

В плазме крови человека присутствуют 4 основных класса липидов: холестерин и его эфиры, триглицериды, фосфолипиды! и неэстерифицированные жирные кислоты (НЭЖК). Первые три класса веществ образуют комплексы с апопротеинами и входят в состав липопротеинов.

Различают 3 группы липопротеинов. Наиболее крупными являются хиломикроны (ХМ) и липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП, или пребеталипопротеины). Они богаты триглицеридами, содержат апопротеины С. Менее крупными частицами являются липопротеины низкой плотности (ЛПНП или беталипопротеины), которые содержат апопротеины В. Самыми мелкими являются липопротеины высокой плотности (ЛПВП или альфалипопротеины), в состав которых входят апопротеины А.